• 制取不同浓度的标准蛋白溶液：可取普通洁净的试管7支，1号管取放0.1mL去离子水作为空白组，2-6号用微量移液器分别加入1.0mg/mL的BSA溶液0.02、0.04、0.06、0.08、0.10mL，然后每管均用去离子水补充到0.1mL，另外7号试管取放待测蛋白溶液0.1mL，所有试管用涡旋混匀器充分混匀；
• 加入染色试剂：用移液器或者移液管向上述试管分别加入3.0mL考马斯亮蓝G250试剂，用涡旋混匀器轻轻快速混合均匀；
• 比色：考马斯亮蓝试剂与蛋白质结合速度快，2-5分钟即可完成，1小时内保持稳定，故可以在溶液静置5分钟后在分光光度计上测定各试管溶液在波长595nm处的光吸收值A₅₉₅；
• 比色时使用的比色皿选用玻璃或者塑料比色皿，不要使用石英或者硅胶比色皿，因为考马斯亮蓝染料容易结合附着于石英或硅胶材料上，不易洗去染色。
• 比色完成后及时用水清洗，再用40%乙醇润洗，洗去颜色，最后再用水洗净。
• 如果使用的是塑料比色皿，乙醇润洗时间不宜过长，决不能在乙醇或者丙酮中长时间浸泡，因为那会导致塑料比色皿溶胀失真。
• 制作标准曲线：以标准蛋白溶液浓度（mg/mL）为横坐标，吸光度值A₅₉₅为纵坐标作图，可进行直线拟合，即可得到一条标准曲线；
• 计算待测蛋白质浓度：将分光光度计测出的待测蛋白质溶液的光吸收度A₅₉₅值，对照标准曲线即可算出待测蛋白质浓度。

点成DEN-600光度计， 是一款紧凑、便携、可电池供电的光度计，可以方便地放置在生物安全柜、培养箱中，该设备可容纳10mm光程的标准比色皿、普通圆底试管或离心管等。USB连接和DEN软件可进行数据传输、数据处理和计算。600 nm波长光学系统设计可以进行如下测量：估算细胞总数（OD600）、浊度测量（McFarland单位）、蛋白质浓度测量（Bradford 蛋白质测定法）。分光光度计通常应用于这些领域，因此DEN-600可作为分光光度计的平价替代品。